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博亚体育官方app下载-Elisa实验:三类样本的收集整理技巧
博亚 发布时间:2023-11-18 博亚 来源:博亚科技 FPI 公众号 博亚 浏览量:143

  Elisa尝试:三类样本的搜集清算技能

  一般来讲,因为ELISA尝试只能检测可溶性卵白质的含量,是以要求样本应清楚透明并离心除去沉淀物或悬浮物资。为确保尝试的正确性, -20℃或-80℃保留的样本应在1-6个月内完成检测,4℃保留的样本在一周内完成检测。另外,样本中不克不及含有会HRP活性的NaN3,不然会造成假阴性成果。

  可用在ELISA尝试的样本一般有血清、血浆、尿液、细胞培育上清和组织匀浆等。分歧样本类型的预处置方式也分歧。恰当的样本预处置是确保ELISA尝试准确性和正确性的步。这里,我们将介绍几种分歧样本类型的处置方式。

  液体样本处置原则:所有的液体样本,用无菌管搜集,2-8℃前提离心20分钟摆布(2000-3000转/分)

  1、血清

  血清是ELISA尝试最经常使用的样本,其预处置也十分简单。利用无热原无内毒素的试管或离心管收集血液样本,将试管或离心管在室内温度下放置天然凝固(视室温情况10分钟到2小时不等)或4℃留宿,分手出血清,(建议倾斜试管或离心管以扩年夜液面的横截面,使血清能更年夜水平的分手出来,),2-8℃前提离心5分钟摆布(5000-6000转/分钟),细心搜集上清,当即进行测定,建议在-20℃或-80℃下将搜集的血清分装保留,避免频频冻融,保留进程中如呈现沉淀,应再次离心。

  留意事项:在搜集血液样本的进程中应避免溶血,由于红细胞在消融时会释放具有过氧化物酶活性的物资,这类环境下,ELISA尝试中将会呈现非特异性显色反映,致使检测成果禁绝确,呈现假阳性成果。别的,样本还应避免细菌污染,由于细菌可能含有内源性HRP,也会致使检测成果禁绝确。

  2、血浆

  应按照标本的要求选择EDTA、肝素钠、枸橼酸纳或柠檬酸钠作为抗凝剂,利用含抗凝剂的采血管或离心管收集血液样本,收集后30分钟内,夹杂10-20分钟后,2-8℃前提离心5分钟摆布(5000-6000转/分钟),细心搜集上清液(血浆),建议在-20℃或-80℃下将搜集的血清分装保留,避免频频冻融。样本应避免溶血或高血脂。保留进程中若有沉淀构成,利用前应当再次离心。

  留意事项:检测前请细心浏览ELISA试剂盒仿单,查看该试剂盒针匹敌凝剂是不是有非凡要求。

  3、尿液

  用无菌管搜集,2-8℃前提离心5分钟摆布(5000-6000转/分钟)。细心搜集上清,保留进程中若有沉淀构成,应再次离心。

  4、细胞培育上清

  检测排泄性的成分时,用无菌管搜集。将细胞培育上清液吸入离心管中并以2-8℃前提离心5分钟摆布(5000-6000转/分钟),除去细胞碎片和杂质,搜集上清液备用,样本保留在-20℃或-80℃,避免频频冻融,保留进程中若有沉淀构成,利用前应再次离心。

  5、脑脊液

  用无菌管搜集,2-8℃前提离心5分钟摆布(5000-6000转/分钟),细心搜集上清,保留进程中若有沉淀构成,利用前应再次离心。(收集年夜鼠脑脊液)的方式:收集脑脊液时,用湿纱布擦试年夜鼠颈背部皮肤,剪去背毛表露皮肤。两耳连线剪一横暗语(1. 5cm摆布),在此中点向尾侧沿皮下剪开2cm,将皮分手两侧,扩年夜视野。紧贴年夜鼠头骨顺次逐层剪切各肌层,并断端顺次拉向尾侧扩年夜视野。留意,有出血时用干纱布按压止血,连结术口清楚。接近颈后黄韧带时,谨慎地用7号打针针头分手笼盖的肌肉,表露寰枕膜。用1ml打针器(针头用止血钳使针尖与针体成150度钝角),针斜面向上,针近程度刺入蛛网膜下腔,固定针体,迟缓抽取脑脊液,一般收集量为100-200微升。)

  6、唾液

  用无菌管搜集,2-8℃前提离心5分钟摆布(5000-6000转/分钟),细心搜集上清,保留进程中若有沉淀构成,利用前应再次离心。

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标签:ELISA尝试

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